connexin 37 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420559

Übersicht

Das Mausgen **Gja4** kodiert Connexin 37 (Cx37), ein Gap-Junction-Protein, das sich zu interzellulären Kanälen zusammenlagert und so den direkten Austausch von Ionen und kleinen Metaboliten ermöglicht, um die Gewebehomöostase zu koordinieren. Cx37 trägt zu kontaktabhängiger Signalübertragung bei, die das Verhalten von Endothel- und glatten Muskelzellen prägt, und spielt eine Rolle in der Gefäßentwicklung, der Regulation der Barrierefunktion und der Mechanotransduktion. Über die gap-junction-vermittelte interzelluläre Kommunikation beeinflusst es Prozesse wie Zellzykluskontrolle, Migration und inflammatorische Signalwege. Eine veränderte Connexin-37-Funktion wurde mit vaskulärer Dysfunktion und kardiovaskulär relevanten Phänotypen in Verbindung gebracht, was seinen Einsatz in Modellen der Angiogenese, thrombosebezogener Signalwege und des immun-vaskulären Crosstalks unterstützt.

Das connexin 37 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Gja4-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Gja4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Gja4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die connexin 37-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Gja4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der connexin 37-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Gja4-Exone abzielen, die für die connexin 37-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Gja4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom connexin 37 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom connexin 37 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Gja4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das connexin 37 HDR-Plasmid (m) und connexin 37 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Gja4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Gja4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.