COLEC11 Lentiviral Activation Particles (h): sc-413098-LAC

COLEC11 kodiert Collectin-11, ein sezerniertes C‑Typ‑Lektin zur Mustererkennung, das mikrobielle sowie veränderte körpereigene Kohlenhydratmotive bindet und so die angeborene Immunüberwachung fördert. Durch die Bildung von Komplexen mit MASP‑Proteasen kann COLEC11 die Komplementaktivierung über den Lektinweg auslösen und damit Opsonisierung, entzündliche Signalübertragung und die Beseitigung apoptotischer Zelltrümmer beeinflussen. Die COLEC11‑Aktivität überschneidet sich mit Interaktionen der extrazellulären Matrix und Entwicklungsprozessen, und Störungen von Komponenten des Lektinwegs werden mit Immundysregulation und erhöhter Infektanfälligkeit in Verbindung gebracht. Genetische Varianten in COLEC11 wurden zudem mit Entwicklungsphänotypen assoziiert, was seinen Einsatz in Studien zur Komplementbiologie, zu Wirt‑Pathogen‑Interaktionen und zur Gewebehomöostase unterstützt.

COLEC11 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente COLEC11-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

COLEC11 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der COLEC11-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen COLEC11-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen COLEC11-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.