CMTM6 Double Nickase Plasmid (m): sc-426447-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CMTM6 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CMTM6 Double-Nickase-Plasmid (m) und CMTM6 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Cmtm6 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CMTM6 Double Nickase Plasmid (m) | sc-426447-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CMTM6 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-426447-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cmtm6 kodiert CMTM6, ein tetra-transmembranöses MARVEL-Domänenprotein, das die Biologie von Immun-Checkpoints reguliert, indem es PD-L1 an der Zelloberfläche stabilisiert und dessen lysosomalen Abbau begrenzt. Durch die Kontrolle des PD-L1-Transports und der Membranretention beeinflusst CMTM6 die Zell‑Zell‑Signalübertragung, antigen-spezifische T‑Zell‑Antworten und umfassendere inflammatorische Signalwege in der Tumormikroumgebung. In Mausmodellen wird CMTM6 häufig im Zusammenhang mit Mechanismen der Immunflucht und seinem Einfluss auf interferongetriebene Signalzustände untersucht. Eine dysregulierte Aktivität der CMTM6–PD‑L1‑Achse wurde in Krebsmodellen mit veränderter Immunüberwachung sowie mit immunvermittelten Krankheitsprozessen in Verbindung gebracht, die von Checkpoint‑Regulation abhängen.
CMTM6 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Cmtm6-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Cmtm6 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Cmtm6-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Cmtm6-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.