Plasmide Double Nickase (h) CKR-7: sc-402150-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CKR-7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CKR-7 Double Nickase (h) et le plasmide CKR-7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCR7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CKR-7 Antibody (ELC-Fc): sc-23936
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CKR-7 | sc-402150-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CKR-7 | sc-402150-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCR7 code pour le récepteur de chimiokines CKR-7, un récepteur couplé aux protéines G qui se lie à CCL19 et à CCL21 afin de réguler la chimiotaxie des leucocytes et leur adressage tissulaire. La signalisation de CKR-7 mobilise des voies dépendantes de Gαi qui coordonnent le remodelage de l’actine, l’activation des intégrines et la migration directionnelle, soutenant le trafic des lymphocytes et la localisation des cellules dendritiques au sein des organes lymphoïdes secondaires. Par ces processus, CCR7 contribue à la surveillance immunitaire, à l’architecture lymphoïde et au recrutement de cellules inflammatoires. Une expression ou une signalisation dérégulée de CCR7 a été associée à une répartition modifiée des cellules immunitaires et a été étudiée dans des contextes tels que l’inflammation chronique, l’auto-immunité et les interactions tumeur–système immunitaire.
CKR-7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCR7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCR7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCR7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCR7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.