CIITA Lentiviral Activation Particles (m2): sc-419390-LAC-2

Das Mausgen *Ciita* kodiert den Transaktivator des Haupthistokompatibilitätskomplexes Klasse II (CIITA), einen nicht an DNA bindenden Masterregulator, der über Interaktionen mit dem Enhanzosom aus RFX, NF-Y und CREB/ATF die Transkription von MHC‑Klasse‑II‑Genen sowie begleitenden Faktoren der Antigenpräsentation koordiniert. Die CIITA-Aktivität steuert die induzierbare Antigenpräsentation in professionellen antigenpräsentierenden Zellen und kann durch Zytokinsignale wie IFN‑γ stimuliert werden, wodurch angeborene Immunreize mit adaptiven CD4+‑T‑Zell‑Antworten verknüpft werden. Eine Fehlregulation der *Ciita*/CIITA-Funktion ist in Mausmodellen mit veränderter MHC‑Klasse‑II‑Expression und Immunphänotypen verbunden, die für Infektionen, Autoimmunität und die Immunüberwachung von Tumoren relevant sind. *Ciita*-Geneditierung und auf CIITA fokussierte Perturbationsstudien unterstützen mechanistische Forschung zu Antigenpräsentationswegen, zur epigenetischen Kontrolle der Transkription von Immungenen sowie zu funktionellen Genomik-Screens in Immunologie und Entzündung.

CIITA Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Ciita-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CIITA Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Ciita-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CIITA-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Ciita-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.