Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CHMP1A (h): sc-406556
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CHMP1A Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CHMP1A, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CHMP1A Antibody (B-5): sc-271617
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CHMP1A (h) | sc-406556 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CHMP1A (charged multivesicular body protein 1A) est un composant central de la machinerie ESCRT-III, qui remodèle les membranes afin de favoriser la biogenèse des corps multivésiculaires et le tri du cargo endosomal vers la dégradation lysosomale. Par le biais de processus dépendants d’ESCRT, CHMP1A contribue à la diminution de l’expression des récepteurs, à des événements de scission membranaire, ainsi qu’à une régulation plus large de la protéostasie, de la cytocinèse et de la dynamique de l’enveloppe nucléaire. La perturbation du trafic endolysosomal associé à CHMP1A peut modifier la durée d’activation des voies de signalisation et l’homéostasie cellulaire, reliant le dysfonctionnement d’ESCRT à des phénotypes neurodéveloppementaux et à d’autres troubles caractérisés par un défaut de trafic membranaire. En tant que gène humain, CHMP1A est fréquemment étudié dans des contextes où la maturation des endosomes et le contrôle de la signalisation médiée par les vésicules sont au cœur d’états cellulaires pertinents pour la maladie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CHMP1A (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CHMP1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CHMP1A, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CHMP1A à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CHMP1A.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CHMP1A pour l'étude de la signalisation de CHMP1A, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CHMP1A essentiels à la fonction de CHMP1A
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CHMP1A pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CHMP1A plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CHMP1A plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CHMP1A. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CHMP1A plasmide HDR (h) et le CHMP1A (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CHMP1A pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CHMP1A définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.