ChemR23 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403033-LAC

CMKLR1 kodiert ChemR23, einen G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der auf mehreren Populationen von Immunzellen exprimiert wird und das Chemoattraktans Chemerin (RARRES2) sowie verwandte Liganden erkennt, um gerichtete Migration und inflammatorische Signalgebung zu regulieren. Die Aktivierung von ChemR23 setzt klassische GPCR‑Signalwege in Gang, darunter eine Gαi‑abhängige Hemmung von cAMP sowie nachgeschaltete MAPK/ERK‑ und PI3K/AKT‑Signale, die die Zytokinproduktion, den Leukozytenverkehr und die immunologische Gewebeüberwachung prägen. Neben Chemerin kann ChemR23 auch auf spezialisierte pro‑resolvierende Lipidmediatoren wie Resolvin E1 reagieren und ist damit mit Programmen verknüpft, die Entzündung und deren Auflösung koordinieren. Eine dysregulierte CMKLR1/ChemR23‑Signalgebung wurde mit chronischen Entzündungszuständen und metabolischer Dysfunktion in Verbindung gebracht, was sie zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung des immun‑metabolischen Crosstalks und der Regulation inflammatorischer Schaltkreise macht.

ChemR23 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CMKLR1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ChemR23 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CMKLR1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ChemR23-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CMKLR1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.