Cerebellin 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407032

Descripción general

CBLN1 codifica la cerebelina 1, una glicoproteína secretada enriquecida en el sistema nervioso central que actúa como organizador sináptico, favoreciendo la formación y el mantenimiento de sinapsis excitadoras. La cerebelina 1 participa en complejos de adhesión transináptica que acoplan especializaciones presinápticas y postsinápticas, moldeando la conectividad sináptica y la neurotransmisión en el cerebelo y en circuitos relacionados. A través de estas interacciones, influye en el desarrollo neuronal, la plasticidad sináptica y los procesos de refinamiento de circuitos fundamentales para la coordinación motora y el aprendizaje. La expresión alterada de CBLN1 o la desorganización sináptica mediada por cerebelinas se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, por lo que resulta relevante para estudios mecanísticos de sinaptopatías.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Cerebellin 1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CBLN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CBLN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CBLN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Cerebellin 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CBLN1 para la investigación de la señalización de Cerebellin 1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CBLN1 críticos para la función de Cerebellin 1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CBLN1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Cerebellin 1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Cerebellin 1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CBLN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Cerebellin 1 (h) y el plásmido HDR Cerebellin 1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CBLN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CBLN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.