Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CEP55 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417522
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CEP55 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CEP55, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CEP55 Anticorpo (B-8): sc-374051
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CEP55 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417522 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CEP55 (proteína centrosomal 55) é um regulador da citocinese que se localiza nos centrossomos e no corpo médio (midbody), onde auxilia a abscisão ao coordenar o recrutamento da maquinaria ESCRT durante a mitose tardia. Por meio de interações com proteínas de ancoragem do corpo médio e fatores de remodelação de membrana, a CEP55 ajuda a assegurar uma divisão celular fiel, a estabilidade do genoma e a conclusão adequada do ciclo celular. A expressão desregulada de CEP55 tem sido associada a fenótipos proliferativos e à instabilidade cromossómica observados em múltiplos contextos de cancro, tornando-a um alvo útil para estudar o controlo mitótico. A CEP55 também é relevante para vias que governam a dinâmica dos centrossomos, a organização do fuso mitótico e as respostas de checkpoint à falha na citocinese.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CEP55 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CEP55 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CEP55, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CEP55 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CEP55.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CEP55 para a investigação da sinalização de CEP55, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CEP55 críticos para a função CEP55
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CEP55 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CEP55 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CEP55 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CEP55. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CEP55 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CEP55 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CEP55 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CEP55 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.