CEACAM7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406726

Übersicht

CEACAM7 (carcinoembryonales Antigen‑verwandtes Zelladhäsionsmolekül 7) ist ein über einen GPI‑Anker membranverankertes Mitglied der Immunglobulin‑Superfamilie und an homophiler sowie heterophiler Zell‑Zell‑Adhäsion an epithelialen Oberflächen beteiligt. Über Interaktionen, die die Membranorganisation und kontaktabhängige Signalübertragung beeinflussen, trägt CEACAM7 zur epithelialen Differenzierung, Polarität und zu barriereassoziierten Prozessen in mukosalen Geweben bei. Eine veränderte CEACAM7‑Expression wurde mit epithelialem Remodeling sowie tumorassoziierten Veränderungen in Adhäsions‑ und Differenzierungsprogrammen in Verbindung gebracht, was CEACAM7 zu einem nützlichen molekularen Knotenpunkt für die Untersuchung von Mechanismen macht, die Zelladhäsion mit Wachstumskontrolle verknüpfen. In der Krebsbiologie und der Forschung an mukosalen Epithelien wird CEACAM7 häufig zusammen mit verwandten Mitgliedern der CEACAM‑Familie untersucht, um Kompensationsmechanismen in Signalwegen und adhäsionsgetriebene Phänotypen besser zu verstehen.

Das CEACAM7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CEACAM7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CEACAM7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CEACAM7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CEACAM7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CEACAM7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CEACAM7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CEACAM7-Exone abzielen, die für die CEACAM7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CEACAM7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CEACAM7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CEACAM7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CEACAM7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CEACAM7 HDR-Plasmid (h) und CEACAM7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CEACAM7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CEACAM7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.