Partículas Lentivirales de Activación (m) CEACAM1: sc-424008-LAC

Ceacam1 codifica en el ratón la molécula de adhesión celular 1 relacionada con el antígeno carcinoembrionario (CEACAM1), un receptor de la superfamilia de las inmunoglobulinas que media interacciones célula–célula homofílicas y heterofílicas e integra la señalización a través de sus motivos citoplasmáticos tipo ITIM/ITAM. CEACAM1 participa en la regulación de la organización epitelial, la función de barrera endotelial y la activación de leucocitos, influyendo en vías vinculadas a la dinámica de adhesión celular, el reclutamiento de fosfatasas y una señalización tipo punto de control inmunitario. En modelos murinos, la actividad alterada de CEACAM1 se ha asociado con la modulación de respuestas inflamatorias, la homeostasis metabólica y la remodelación tisular, lo que la hace relevante para estudios de microambientes asociados al cáncer, biología de infecciones y regulación inmunitaria. Su expresión en compartimentos hematopoyéticos y parenquimatosos la convierte en un nodo útil para diseccionar el diálogo cruzado entre la señalización de adhesión y las respuestas impulsadas por citocinas.

Las partículas de activación lentiviral CEACAM1 (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Ceacam1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral CEACAM1 (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Ceacam1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de CEACAM1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Ceacam1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.