Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400570-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CDKN2B/p15 INK4B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CDKN2B/p15 INK4B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CDKN2B/p15 INK4B Anticorpo (D-12): sc-271791
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-400570-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDKN2B codifica a p15 INK4B, um inibidor de quinase dependente de ciclina que se liga a CDK4/6 para restringir a fosforilação de RB dependente de ciclina D e impor o checkpoint G1/S. Sua expressão é comumente induzida por sinais antiproliferativos, como a sinalização de TGF-β, conectando o estresse extracelular e programas de diferenciação à parada do ciclo celular e à senescência. CDKN2B está inserido no lócus 9p21, uma região genômica frequentemente alterada no câncer e implicada na suscetibilidade a diversos traços relacionados ao envelhecimento e cardiometabólicos. A desregulação do controle de CDK4/6 mediado por p15 INK4B contribui para proliferação aberrante, alterações no comprometimento de linhagem e escape de vias inibitórias de crescimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CDKN2B/p15 INK4B (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDKN2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDKN2B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDKN2B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CDKN2B/p15 INK4B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDKN2B para a investigação da sinalização de CDKN2B/p15 INK4B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDKN2B críticos para a função CDKN2B/p15 INK4B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDKN2B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDKN2B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CDKN2B/p15 INK4B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDKN2B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDKN2B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.