Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdc6 (h): sc-400796
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Cdc6 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Cdc6, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cdc6 Antibody (180.2): sc-9964
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdc6 (h) | sc-400796 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CDC6 code pour Cdc6, une ATPase essentielle qui autorise les origines de réplication de l’ADN en assemblant, avec ORC, CDT1 et MCM2–7, le complexe pré-réplicatif durant la phase G1. La régulation stricte de CDC6, via l’activité des CDK et le renouvellement médié par l’ubiquitine, coordonne la transition G1/S et contribue à imposer le calendrier de réplication ainsi que les points de contrôle de la stabilité du génome. Une expression ou un contrôle dérégulé de CDC6 peut favoriser un stress de re-réplication, l’activation de la signalisation des dommages à l’ADN et l’instabilité chromosomique, des caractéristiques fréquemment associées à la transformation oncogénique. CDC6 est donc largement étudié dans le contrôle du cycle cellulaire, les réponses au stress réplicatif et les mécanismes reliant une altération de l’autorisation des origines à l’instabilité génomique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdc6 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CDC6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CDC6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CDC6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Cdc6.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CDC6 pour l'étude de la signalisation de Cdc6, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CDC6 essentiels à la fonction de Cdc6
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CDC6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Cdc6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Cdc6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CDC6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Cdc6 plasmide HDR (h) et le Cdc6 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CDC6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CDC6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.