CD97 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2): sc-404492-KO-2

Übersicht

ADGRE5 kodiert CD97, einen Adhäsions‑G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der vor allem auf Leukozyten exprimiert wird und Zell‑Zell‑ sowie Zell‑Matrix‑Interaktionen vermittelt. CD97 durchläuft eine autoproteolytische Prozessierung und signalisiert über heterotrimere G‑Proteine, wodurch es Zytoskelett‑Remodellierung, Migration und die Positionierung von Immunzellen beeinflusst und dabei Signale aus Komponenten der extrazellulären Matrix und Komplement‑Regulatorproteinen integriert. Über seine Funktionen in Adhäsion und Leukozyten‑Trafficking trägt CD97 zur Dynamik entzündlicher Mikroumgebungen bei und wurde in Zusammenhängen von Immundysregulation sowie Tumor‑Immun‑Interaktionen untersucht. Seine Aktivität verknüpft adhäsionsabhängige Signalgebung mit nachgeschalteten Signalwegen, die Chemotaxis, Gewebeinfiltration und interzelluläre Kommunikation prägen.

Das CD97 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ADGRE5-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ADGRE5-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ADGRE5 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CD97-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ADGRE5-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CD97-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ADGRE5-Exone abzielen, die für die CD97-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ADGRE5-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CD97 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CD97 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ADGRE5-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CD97 HDR-Plasmid (h) und CD97 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ADGRE5-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ADGRE5-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.