Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CD84 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416482
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD84 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD84, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD84 Anticuerpo (152-1D5): sc-23899
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD84 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-416482 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CD84 es un receptor de la superfamilia de inmunoglobulinas de la familia SLAM que se expresa predominantemente en células inmunitarias, donde participa en la adhesión homofílica y en la señalización coestimuladora que modula la activación de los linfocitos y la comunicación intercelular. A través de asociaciones con proteínas adaptadoras como SH2D1A/SAP y quinasas aguas abajo, CD84 influye en eventos de señalización vinculados a la formación de la sinapsis inmunológica, las respuestas de citocinas y la regulación de las interacciones entre células B y células T. Se ha descrito una expresión o señalización alterada de CD84 en contextos de desregulación inmunitaria, incluidos estados inflamatorios y fenotipos inmunitarios asociados a neoplasias hematológicas. Como nodo inmunorregulador de superficie, CD84 se estudia con frecuencia en vías que gobiernan la activación y diferenciación de leucocitos y la señalización dependiente del contacto célula–célula.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD84 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CD84 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CD84 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CD84 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD84.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CD84 para la investigación de la señalización de CD84, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CD84 críticos para la función de CD84
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CD84 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD84 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CD84 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CD84. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD84 (h) y el plásmido HDR CD84 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CD84 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CD84 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.