CD83 Plasmide Double Nickase (h): sc-401864-NIC

CD83 codifica una glicoproteina di tipo I transmembrana appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, rapidamente indotta durante la maturazione delle cellule dendritiche ed espressa anche dalle cellule B attivate e da sottopopolazioni di cellule T. CD83 contribuisce alla presentazione dell’antigene e al priming delle cellule T modulando la formazione della sinapsi immunologica, la segnalazione costimolatoria e la stabilità e il traffico dei recettori immunitari di membrana, intersecando programmi di attivazione collegati a NF-κB e vie di differenziazione guidate dalle citochine. Per questi ruoli, CD83 è comunemente studiata in contesti di tolleranza immunitaria, segnalazione infiammatoria e regolazione dell’immunità adattativa. Alterazioni nei livelli di espressione di CD83 e nei suoi pattern di shedding sono state associate a disregolazione immunitaria nell’autoimmunità, nell’infiammazione cronica e nelle interazioni tra tumore e sistema immunitario, a supporto del suo impiego come marcatore meccanicistico nella ricerca immunologica.

CD83 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD83 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD83. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD83. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD83 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.