CD37 Lentiviral Activation Particles (m): sc-419547-LAC

Cd37 kodiert CD37, ein Oberflächen‑Glykoprotein der Tetraspanin‑Familie, das stark auf B‑Zellen und anderen Leukozyten‑Subsets exprimiert wird und dort Membran‑Mikrodomänen organisiert, die die Rezeptorsignalübertragung koordinieren. CD37 moduliert den B‑Zell‑Rezeptor sowie kostimulatorische Signalwege und beeinflusst dabei die Aktivität von Src‑Familien‑Kinasen, die PI3K/AKT‑Signalgebung, den Calcium‑Flux und nachgeschaltete Transkriptionsprogramme, die Aktivierung, Proliferation und Überleben steuern. Über seine Rolle beim Transport sowie bei der Clusterbildung von Immunrezeptoren und Adhäsionsmolekülen trägt CD37 zur Antigenpräsentation, Zellmigration und zur Bildung der immunologischen Synapse bei. Veränderte CD37‑Expression oder ‑Funktion wurde mit Immunfehlregulation und der Biologie B‑zellassoziierter hämatologischer Erkrankungen in Zusammenhang gebracht, was CD37 zu einem relevanten Ziel für mechanistische Studien von Signalnetzwerken in Lymphozyten macht.

CD37 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Cd37-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD37 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Cd37-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD37-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Cd37-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.