Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CD3-ζ Antibody (6B10.2) Alexa Fluor® 594: sc-1239 AF594. Direct fluorescent western blot analysis of CD3-ζ expression in CCRF-CEM (A), SUP-T1 (B) and ALL-SIL (C) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CD3-ζ双切口酶质粒(h): sc-400591-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CD3-ζ 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CD3-ζ双切酶质粒（h）和CD3-ζ双切酶质粒（h2）编码针对CD247的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CD3-ζ: sc-1239，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CD3-ζ双切口酶质粒(h) | sc-400591-NIC | 20 µg | $410.00 |
CD247 基因编码 CD3-ζ（zeta）链，它是 T 细胞受体（TCR）–CD3 复合物中至关重要的信号传导组分，负责将抗原识别与细胞内激活过程相连接。CD3-ζ 通过其胞质结构域内的免疫受体酪氨酸基激活基序（ITAM），招募并激活 LCK、ZAP70 等激酶，进而传导包括 LAT/SLP-76 信号、MAPK、NF-κB 和 NFAT 在内的下游通路，从而调控 T 细胞的激活、增殖与效应分化。CD247 的表达或信号异常与免疫失衡相关，常在自身免疫、慢性感染以及肿瘤相关 T 细胞功能障碍等研究背景中被关注。因此，CD3-ζ 是解析 TCR 信号强度、激活阈值以及人类免疫细胞中 T 细胞耗竭机制的重要分子抓手。
CD3-ζ 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CD247 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD247内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CD247的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CD247基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。