CD24 Lentiviral Activation Particles (h): sc-418762-LAC

Humanes CD24 kodiert ein stark glykosyliertes, GPI-verankertes Zelloberflächenprotein, das als kontextabhängiger Regulator von Zelladhäsion, Immunerkennung und Signaltransduktion fungiert. CD24 ist an der Organisation von Membran-Mikrodomänen beteiligt und moduliert über Interaktionen mit Rezeptorkomplexen und Mitgliedern der Lektinfamilie Signalwege, die mit der MAPK/ERK- und PI3K/AKT-Aktivität verknüpft sind. In hämatopoetischen und epithelialen Zelllinien beeinflusst CD24 den Differenzierungszustand und die Zell-Zell-Kommunikation und prägt dadurch Entzündungs- sowie Gewebeumbau-Reaktionen. Veränderte CD24-Expression wird in der Onkologie- und Immunologieforschung häufig untersucht, insbesondere aufgrund ihrer Zusammenhänge mit Tumorzell-Plastizität, metastatischen Eigenschaften und der Regulation der angeborenen Immunantwort.

CD24 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CD24-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD24 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CD24-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD24-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CD24-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.