Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD24 Double Nickase Plasmid (m): sc-419540-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CD24 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CD24 Double-Nickase-Plasmid (m) und CD24 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Cd24a abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CD24: sc-19585
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CD24 Double Nickase Plasmid (m) | sc-419540-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD24 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-419540-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cd24a kodiert das glycosylphosphatidylinositol-(GPI)-verankerte Oberflächenprotein CD24, ein stark glykosyliertes immunmodulatorisches Molekül, das bei der Maus auf mehreren hämatopoetischen und epithelialen Zelltypen exprimiert wird. CD24 ist an Zell-Zell-Interaktionen beteiligt und an der Feinabstimmung angeborener und adaptiver Immunantworten, wobei es die Aktivierung von Leukozyten, Adhäsionsdynamiken und Differenzierungsprogramme beeinflusst. Über ligandenabhängige Signalgebung und die Assoziation mit Membran-Mikrodomänen kann CD24 entzündliche Signalkaskaden prägen und Prozesse wie Antigenansprechbarkeit und Gewebehomöostase beeinflussen. Eine dysregulierte Cd24a-Expression wurde in krankheitsrelevanten Kontexten mit veränderter Immunregulation und zellulärer Plastizität in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als molekulares Werkzeug zur Untersuchung entzündungsassoziierter Phänotypen und Tumor-Immun-Interaktionen in Mausmodellsystemen unterstützt.
CD24 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Cd24a-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Cd24a abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Cd24a-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Cd24a-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.