CD16 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400544-LAC

Das humane Gen **FCGR3A** kodiert **CD16 (FcγRIIIa)**, einen niedrigaffinen Fc-Rezeptor für IgG, der insbesondere auf natürlichen Killerzellen, Makrophagen und bestimmten Monozyten-Subpopulationen stark exprimiert wird. Die Bindung von CD16 durch Immunkomplexe initiiert über ITAM-tragende Adapterketten (FcRγ/CD3ζ) eine Signalübertragung und aktiviert Src-/Syk-abhängige Signalwege, die antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität, Phagozytose, Zytokinproduktion sowie die Modulation angeborener Immunaktivierungsschwellen regulieren. Unterschiede in der FCGR3A-Expression und der Rezeptoraktivität beeinflussen Fc-vermittelte Effektorfunktionen und wurden mit Phänotypen der Immundysregulation in Zusammenhang gebracht, die in Autoimmunität, chronischer Infektion und der Krebsimmunbiologie untersucht werden. Diese Eigenschaften machen CD16 zu einem breit verwendeten Marker und funktionellen Knotenpunkt für die Untersuchung von Fc-Rezeptor-Signalgebung, NK-Zell-Aktivierungsprogrammen und der Antikörper–Immunkomplex-Biologie.

CD16 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FCGR3A-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD16 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FCGR3A-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD16-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FCGR3A-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.