CD151 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401969

Übersicht

CD151 (Tetraspanin-24) ist ein Tetraspanin mit vier Transmembran-Domänen, das tetraspanin-angereicherte Mikrodomainen organisiert und an der Plasmamembran Adhäsions- und Signalübertragungskomplexe als Gerüstprotein zusammenführt. Durch die Partnerschaft mit lamininbindenden Integrinen wie ITGA3/ITGB1 und ITGA6/ITGB4 reguliert CD151 die Zell-Matrix-Adhäsion, das Ausbreiten (Spreading) und die Motilität von Zellen und moduliert nachgeschaltete Signalwege über fokale Adhäsionen sowie Prozesse des Zytoskelett-Remodelings. CD151 beeinflusst zudem den Membrantransport und die Exosomen-Biologie, indem es die Verteilung von Rezeptoren und die Signalweiterleitung mitprägt. Eine dysregulierte Expression oder Funktion von CD151 wird mit veränderter epithelialer Integrität und invasiven Phänotypen in der Krebsbiologie sowie mit Nieren- und Gefäßpathophysiologie in Verbindung gebracht, was es zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien macht.

Das CD151 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CD151-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CD151-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CD151 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CD151-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CD151-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CD151-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CD151-Exone abzielen, die für die CD151-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CD151-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CD151 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CD151 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CD151-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CD151 HDR-Plasmid (h) und CD151 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CD151-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CD151-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.