Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CCS (h): sc-402130
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CCS Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CCS, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CCS Antibody (H-7): sc-55561
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CCS (h) | sc-402130 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CCS (chaperon du cuivre de la superoxyde dismutase) est une métallochaperonne cytosolique qui délivre le cuivre à SOD1 et favorise sa maturation via une interaction directe et la formation de ponts disulfure. En permettant une activité correcte de SOD1, CCS soutient les défenses antioxydantes cellulaires et limite les dommages oxydatifs issus de la respiration mitochondriale et d’autres processus redox. La fonction de CCS est liée à l’homéostasie du cuivre et à la signalisation redox, avec des effets en aval sur des voies sensibles au stress qui influencent la stabilité des protéines et la viabilité cellulaire. La dérégulation de l’axe CCS–SOD1 a été étudiée dans des contextes de biologie du stress oxydatif et de neurodégénérescence, où une gestion altérée des métaux et des espèces réactives de l’oxygène contribuent à des phénotypes associés aux maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CCS (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CCS dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CCS, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CCS à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CCS.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CCS pour l'étude de la signalisation de CCS, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CCS essentiels à la fonction de CCS
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CCS pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CCS plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CCS plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CCS. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CCS plasmide HDR (h) et le CCS (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CCS pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CCS définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.