Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CBX7 (m): sc-424634
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CBX7 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CBX7, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CBX7 Antibody (G-3): sc-376274
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CBX7 (m) | sc-424634 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cbx7 code la protéine homologue 7 de Chromobox (CBX7), un lecteur de H3K27me3 contenant un chromodomaine, qui agit comme composant central du complexe répressif Polycomb 1 (PRC1) afin de maintenir un silence transcriptionnel stable. Dans les cellules de souris, CBX7 contribue au contrôle épigénétique de l’engagement de lignée, de la régulation du cycle cellulaire et de la sénescence en favorisant la compaction de la chromatine et la répression de loci du développement et de gènes suppresseurs de tumeurs. L’activité Polycomb dépendante de CBX7 s’articule avec les programmes de différenciation et les réseaux d’auto-renouvellement des cellules souches, façonnant des états d’expression génique à long terme. La dérégulation de la répression médiée par Polycomb, notamment via une altération de la fonction de CBX7, est largement étudiée dans l’oncogenèse, les phénotypes associés au vieillissement et les troubles du développement, en tant que mécanisme de régulation aberrante de la chromatine.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CBX7 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cbx7 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cbx7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cbx7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CBX7.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cbx7 pour l'étude de la signalisation de CBX7, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cbx7 essentiels à la fonction de CBX7
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cbx7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CBX7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CBX7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cbx7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CBX7 plasmide HDR (m) et le CBX7 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cbx7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cbx7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.