Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Double Nickase Plasmid (h): sc-400648-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Double-Nickase-Plasmid (h) und CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CNR1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1: sc-293419
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400648-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400648-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CNR1 kodiert den Cannabinoid-Rezeptor 1 (CB1), einen Gi/o-gekoppelten GPCR, der auf Endocannabinoide reagiert und dadurch die Adenylylcyclase-Aktivität, die cAMP/PKA-Signalübertragung, die Leitfähigkeit von Ionenkanälen sowie nachgeschaltete MAPK/ERK- und PI3K-assoziierte Signalwege reguliert. CB1 ist im Nervensystem breit exprimiert und trägt zur synaptischen Übertragung, zur Neurotransmitterfreisetzung und zur aktivitätsabhängigen Plastizität bei; darüber hinaus übernimmt er Funktionen in peripheren Stoffwechsel- und immunbezogenen Prozessen. Veränderte CNR1/CB1-Signalgebung wurde mit neuropsychiatrischen und neurodegenerativen Phänotypen, der Schmerzverarbeitung und metabolischer Dysregulation in Verbindung gebracht, weshalb der Rezeptor häufig in der GPCR-Pharmakologie und in neuromodulatorischen Schaltkreisen untersucht wird. In Zellmodellen wird die Störung von CNR1 genutzt, um Rezeptordesensibilisierung und -internalisierung, Bias in der G-Protein-Kopplung sowie Signalweg-Crosstalk zu untersuchen, der die neuronale Erregbarkeit und inflammatorische Signalgebung beeinflusst.
CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CNR1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CNR1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CNR1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CNR1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.