caveolin-2 Double Nickase Plasmid (h): sc-402547-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das caveolin-2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- caveolin-2 Double-Nickase-Plasmid (h) und caveolin-2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CAV2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
caveolin-2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402547-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
caveolin-2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402547-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Human CAV2 kodiert Caveolin-2, ein integrales Membran-Scaffold-Protein, das in Caveolae angereichert ist und dabei hilft, Lipid-Raft-Mikrodomänen zu organisieren sowie Membrankrümmung, Endozytose und die Cholesterinhomöostase zu regulieren. Caveolin-2 wirkt mit Caveolin-1 zusammen, beeinflusst die Assemblierung von Caveolae und moduliert – abhängig vom Zelltyp – Signal-Knotenpunkte wie Rezeptor-Tyrosinkinasen, eNOS/NO-Signalgebung sowie die Dynamik der nachgeschalteten MAPK- und PI3K/AKT-Signalwege. Über Effekte auf Membrantransport, Adhäsion und Mechanotransduktion wurde CAV2 mit vaskulärer und pulmonaler Biologie, metabolischer Regulation und veränderten Signalzuständen in verschiedenen Krankheitskontexten in Verbindung gebracht, einschließlich krebsassoziierter Phänotypen. Als Marker und Regulator der Caveolae-Funktion wird CAV2 häufig in Endothelzellen, Fibroblasten und epithelialen Systemen untersucht, um kompartimentierte Signalgebung und membranabhängige Stressantworten zu analysieren.
caveolin-2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CAV2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CAV2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CAV2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CAV2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.