caspase-8 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400147-LAC

CASP8 kodiert für Caspase‑8, eine initiierende Cystein‑Aspartat‑Protease, die extrinsische Todesrezeptor‑Signalgebung mit nachgeschalteten Caspase‑Kaskaden und Programmen des regulierten Zelltods koppelt. Nach Aktivierung in todinduzierenden Signalkomplexen spaltet Caspase‑8 Effektor‑Caspasen und zentrale Substrate, die die Apoptose prägen, und moduliert zugleich das Crosstalk mit der Nekroptose über die Regulation der RIPK1/RIPK3‑Signalgebung. Über den Zelltod hinaus beeinflusst CASP8 entzündliche und angeboren‑immunologische Signalwege, darunter Signalgebung nachgeschaltet von TNFRSF und Pattern‑Recognition‑Rezeptoren, mit kontextabhängigen Effekten auf die NF‑κB‑Aktivierung. Eine dysregulierte CASP8‑Expression oder ‑Aktivität wurde mit veränderter Immunhomöostase und Tumorbiologie in Verbindung gebracht und macht CASP8 zu einem breit untersuchten Knotenpunkt der Apoptose‑ und Entzündungsforschung.

caspase-8 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CASP8-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

caspase-8 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CASP8-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen caspase-8-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CASP8-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.