Particules Lentivirales d'Activation (h) casein kinase IIα: sc-418515-LAC

CSNK2A1 code pour la sous-unité alpha catalytique de la caséine kinase II (CK2α), une kinase sérine/thréonine constitutivement active qui phosphoryle un large éventail de substrats impliqués dans la transduction du signal, la transcription et le contrôle du cycle cellulaire. CK2α participe à des voies telles que NF‑κB, Wnt/β‑caténine et PI3K/AKT, contribuant à coordonner les réponses aux signaux de croissance et au stress cellulaire. En régulant des protéines associées à la chromatine, des facteurs de réponse aux dommages de l’ADN et des modulateurs de l’apoptose, CSNK2A1 influence la survie cellulaire et la protéostasie. Une activité de CK2 dérégulée a été associée à une prolifération altérée et à une signalisation aberrante dans de multiples contextes pathologiques, faisant de CSNK2A1 un nœud largement étudié au sein des réseaux de signalisation phospho‑dépendants.

Les particules d'activation lentivirales casein kinase IIα (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de CSNK2A1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales casein kinase IIα (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription CSNK2A1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de casein kinase IIα. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif CSNK2A1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.