Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) casein kinase Iα: sc-400898-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) casein kinase Iα correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide casein kinase Iα Double Nickase (h) et le plasmide casein kinase Iα Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CSNK1A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: casein kinase Iα Antibody (H-7): sc-74582
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) casein kinase Iα | sc-400898-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) casein kinase Iα | sc-400898-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSNK1A1 code la caséine kinase Iα humaine, une sérine/thréonine kinase qui phosphoryle divers substrats afin de réguler la transduction des signaux et le renouvellement des protéines. La caséine kinase Iα participe au contrôle de la voie Wnt/β-caténine en phosphorylant des composants de cette voie, et elle contribue également à la régulation des rythmes circadiens, aux réponses aux dommages de l’ADN et aux réseaux de phosphorylations associés au cycle cellulaire. En modulant la stabilité et la localisation, dépendantes de la phosphorylation, de protéines clés de signalisation, CSNK1A1 influence des programmes transcriptionnels et l’homéostasie cellulaire. Une dérégulation de l’activité ou de l’expression de CSNK1A1 a été associée à une altération de la signalisation Wnt ainsi qu’à des perturbations plus larges des programmes de prolifération et de différenciation, pertinentes pour la biologie des cancers et les processus du développement.
casein kinase Iα Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CSNK1A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CSNK1A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CSNK1A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CSNK1A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.