CARM1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404087-LAC

CARM1 (coactivator-associated arginine methyltransferase 1; PRMT4) ist eine Protein-Arginin-Methyltransferase, die die asymmetrische Dimethylierung von Histon H3 (z. B. H3R17/H3R26) sowie zahlreicher Nicht-Histon-Substrate katalysiert, um Transkription, RNA-Prozessierung und Chromatinarchitektur zu regulieren. Über Koaktivatorfunktionen mit nukleären Rezeptoren und Transkriptionsfaktoren beeinflusst CARM1 Programme, die den Zellzyklusfortschritt, Differenzierung, DNA-Schadensantworten und signalabhängige Genexpression steuern. Die durch CARM1 vermittelte Methylierung überschneidet sich mit epigenetischen Signalwegen unter Beteiligung von p300/CBP, SWI/SNF-Chromatin-Remodelling und Transkriptionselongationskomplexen und prägt dadurch linien-/gewebespezifische sowie stressresponsive Transkription. Eine fehlregulierte CARM1-Aktivität und -Expression wurde mit onkogenen Transkriptionsnetzwerken und veränderter zellulärer Plastizität in Verbindung gebracht, was ihre Relevanz für Studien zur Krebsbiologie und hormonresponsiven Signalübertragung unterstreicht.

CARM1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CARM1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CARM1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CARM1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CARM1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CARM1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.