Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) CARD 12: sc-418306-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CARD 12 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CARD 12 (h) y el plásmido de doble nickasa CARD 12 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NLRC4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CARD 12 Anticuerpo (F-3): sc-514658
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CARD 12 | sc-418306-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CARD 12 | sc-418306-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El NLRC4 humano (también conocido como CARD12) codifica un receptor citosólico tipo NOD que inicia el ensamblaje del inflamasoma NLRC4 en respuesta a ligandos bacterianos detectados mediante proteínas NAIP. La formación del inflamasoma promueve la activación de la caspasa-1, la maduración de IL-1β e IL-18 y la inducción de muerte celular piroptótica, vinculando el reconocimiento inmunitario innato con la señalización inflamatoria. NLRC4 actúa en la interfaz entre las vías de reconocimiento de patrones y de procesamiento de citocinas, que moldean la activación mieloide, la defensa epitelial y la homeostasis tisular. La actividad desregulada de NLRC4 y las variantes que afectan el control del inflamasoma se han asociado con fenotipos autoinflamatorios y lesión tisular inflamatoria, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la biología de los inflamasomas.
CARD 12 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NLRC4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NLRC4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NLRC4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NLRC4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.