CAMTA1 Double Nickase Plasmid (h): sc-405328-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CAMTA1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CAMTA1 Double-Nickase-Plasmid (h) und CAMTA1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CAMTA1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CAMTA1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-405328-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAMTA1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405328-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAMTA1 kodiert den calmodulinbindenden Transkriptionsaktivator 1, einen nukleären Transkriptionsfaktor, der die Ca2+/Calmodulin-Signalübertragung mit Genexpressionsprogrammen verknüpft. Über seine CG-1-DNA-Bindedomäne und regulatorische Ankyrin-Repeats integriert CAMTA1 calciumabhängige Signale mit Chromatin- und Transkriptionskontrolle und beeinflusst dadurch die neuronale Differenzierung, die mit synaptischer Aktivität verknüpfte Transkription sowie allgemeinere stressantwortende Signalwege. Eine veränderte Regulation von CAMTA1 wurde mit neuroentwicklungsbedingten und neurodegenerativen Phänotypen in Verbindung gebracht, und genomische Störungen von CAMTA1 werden wiederholt in mehreren Krebsarten beobachtet, was seine Relevanz für Studien zur Transkriptionsdysregulation unterstreicht. Diese Eigenschaften machen CAMTA1 zu einem nützlichen Ziel, um calciumgetriebene Transkriptionsnetzwerke und Zellzustandsübergänge in humanen Modellsystemen zu untersuchen.
CAMTA1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CAMTA1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CAMTA1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CAMTA1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CAMTA1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.