Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) CaMKII gamma: sc-400681-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CaMKII gamma consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CaMKII gamma (h) y el plásmido de doble nickasa CaMKII gamma (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CAMK2G. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CaMKII gamma Anticuerpo (8G10C1): sc-517278
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CaMKII gamma | sc-400681-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CaMKII gamma | sc-400681-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **CAMK2G** codifica la **CaMKII gamma**, una quinasa de serina/treonina activada por Ca2+/calmodulina que convierte los transitorios de calcio en programas de fosforilación que controlan la plasticidad sináptica, el acoplamiento excitación–transcripción y la remodelación del citoesqueleto. CaMKII gamma participa en la señalización de CaMK y en las vías transcripcionales posteriores vinculadas a MAPK/ERK y CREB, influyendo en la motilidad celular, el tráfico vesicular y la expresión génica dependiente de la actividad. Las alteraciones en la actividad o la expresión de CAMK2G se han asociado con una señalización del calcio desregulada, implicada en fenotipos neurológicos y procesos relacionados con la excitabilidad, y también se estudia en contextos de señalización aberrante en vías proliferativas y de respuesta al estrés.
CaMKII gamma El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CAMK2G en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CAMK2G. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CAMK2G. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CAMK2G alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.