Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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calsequestrin 2 Double Nickase Plasmid (h): sc-402912-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das calsequestrin 2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- calsequestrin 2 Double-Nickase-Plasmid (h) und calsequestrin 2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CASQ2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: calsequestrin 2: sc-390999
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
calsequestrin 2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402912-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
calsequestrin 2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402912-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CASQ2 codiert Calsequestrin 2, ein Ca2+-bindendes Protein mit hoher Kapazität und moderater Affinität, das im Lumen des sarkoplasmatischen Retikulums von Kardiomyozyten lokalisiert ist. Dort puffert es Ca2+ und trägt dazu bei, die Erregungs‑Kontraktions‑Kopplung zu formen. Durch die Interaktion mit Ryanodinrezeptor‑Komplexen und luminalen Zubehörproteinen beeinflusst Calsequestrin 2 die Dynamik der Ca2+-Freisetzung, die Stabilität der Ca2+-Speicher sowie Ca2+-abhängige Signalwege, die die Kontraktion und Relaxation des Herzens koordinieren. Eine Störung der CASQ2-Funktion ist mit einer fehlerhaften intrazellulären Ca2+-Handhabung und stressgetriggerten arrhythmogenen Phänotypen verknüpft und macht CASQ2 zu einem zentralen Ansatzpunkt für die Untersuchung der Ca2+-Homöostase des sarkoplasmatischen Retikulums. CASQ2 wird daher häufig in der Forschung zur kardialen Elektrophysiologie, zu Netzwerken des Calcium‑Cyclings und zu Mechanismen der erblichen Arrhythmieanfälligkeit eingesetzt.
calsequestrin 2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CASQ2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CASQ2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CASQ2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CASQ2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.