Plásmido Doble Nickase (m) Calpain 6: sc-419444-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Calpain 6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Calpain 6 (m) y el plásmido de doble nickasa Calpain 6 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Capn6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Calpain 6 | sc-419444-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Capn6 de ratón codifica la calpaína 6 (CAPN6), un miembro atípico de la familia de las calpaínas que carece de actividad catalítica clave, pero conserva funciones como andamiaje regulador en el citoesqueleto. CAPN6 influye en la estabilidad de los microtúbulos, la remodelación de actina y la motilidad celular, vinculándose con vías que controlan la dinámica del citoesqueleto, el tráfico vesicular y programas de diferenciación celular. En tejidos en desarrollo y en contextos miogénicos, CAPN6 se ha asociado con la regulación de estados de proliferación y diferenciación, lo que la hace relevante para estudios de morfogénesis y reparación tisular. Se han descrito alteraciones en la expresión de CAPN6 en fenotipos de remodelación asociados a enfermedad, lo que respalda su investigación en modelos de fibrosis, invasión de células cancerosas y anomalías neuromusculares o del desarrollo, sin implicar resultados clínicos.
Calpain 6 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Capn6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Capn6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Capn6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Capn6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.