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Calpain 2双切口酶质粒(h) | sc-401113-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Calpain 2双切口酶质粒(h2) | sc-401113-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 CAPN2 基因编码钙蛋白酶 2(calpain 2),这是一种钙依赖性的半胱氨酸蛋白酶,可通过有限蛋白水解对细胞骨架及信号相关蛋白进行重塑。钙蛋白酶 2 参与黏着斑周转、膜运输以及由钙信号驱动的应激反应,从而影响细胞迁移、黏附动力学和细胞周期进程。CAPN2 通过对整合素/FAK 信号通路、生长因子响应网络等途径中的底物进行受调控的剪切,帮助塑造细胞可塑性与蛋白质稳态。钙蛋白酶活性失调与细胞骨架异常组织及信号改变相关,这些现象在神经退行性疾病、心血管以及肿瘤相关研究中均有观察到。
Calpain 2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CAPN2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CAPN2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CAPN2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CAPN2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。