Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Cacna2d1 Double Nickase Plasmid (h): sc-402833-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Cacna2d1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Cacna2d1 Double-Nickase-Plasmid (h) und Cacna2d1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CACNA2D1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Cacna2d1: sc-271697
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Cacna2d1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402833-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cacna2d1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402833-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA2D1 kodiert die akzessorische Untereinheit α2δ-1 spannungsabhängiger Calciumkanäle, einen zentralen Regulator für den Transport der Kanäle, die Stabilität in der Membran und die Kanalgating-Eigenschaften, der den Calciumeinstrom während Erregbarkeit und der Kopplung von Reiz und Sekretion prägt. Durch die Modulation der CaV-Kanalfunktion beeinflusst Cacna2d1 calciumabhängige Signalkaskaden, die die Neurotransmitterfreisetzung, Muskelkontraktion und aktivitätsabhängige Genexpression betreffen. Eine veränderte CACNA2D1-Expression oder Regulation des Kanalkomplexes wurde mit dysregulierter Elektrophysiologie und Umbauprozessen in Verbindung gebracht, die in neurologischen und kardiovaskulären Forschungskontexten relevant sind. Als an der Zelloberfläche exponierte Komponente des Kanalkomplexes eignet sich Cacna2d1 zudem dazu, zu untersuchen, wie extrazelluläre Interaktionen und posttranslationale Modifikationen die Verfügbarkeit von Calciumkanälen feinabstimmen.
Cacna2d1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CACNA2D1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CACNA2D1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CACNA2D1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CACNA2D1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.