CA V CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419455

개요

Car5a는 미토콘드리아 탄산무수화효소 V(CA V)를 암호화하며, 이는 아연을 함유한 금속효소로서 미토콘드리아 기질 내에서 CO₂의 가역적 수화 반응을 촉매해 중탄산염을 생성합니다. 이렇게 공급되는 중탄산염은 카복실화 의존 효소들의 기질로 사용되어 보충대사(anaplerosis) 및 생합성 반응을 뒷받침하며, Car5a를 포도당신생합성, 요소생성(ureagenesis), 지질 및 아미노산 대사와 같은 대사 경로와 연결합니다. 대사 요구가 높은 마우스 조직에서 CA V 활성은 미토콘드리아 pH와 탄소 흐름 조절에 기여하여, 결과적으로 세포 에너지 균형과 대사체 항상성에 영향을 줍니다. 미토콘드리아 탄산무수화효소 기능의 변화는 대사 조절 이상과 연관된 바 있으며, 질소 처리 및 중간대사에 영향을 미치는 질환의 맥락에서 연구될 수 있습니다.

CA V CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Car5a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Car5a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Car5a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CA V 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CA V 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Car5a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CA V 기능에 중요한 Car5a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Car5a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CA V CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CA V CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Car5a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CA V HDR 플라스미드 (m) 및 CA V HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Car5a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Car5a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.