Plásmido Doble Nickase (h) C4a: sc-402428-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C4a consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C4a (h) y el plásmido de doble nickasa C4a (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C4A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C4a | sc-402428-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) C4a | sc-402428-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El componente del complemento 4A (C4A) codifica C4a, un fragmento proteolítico generado durante la activación de las vías clásica y de las lectinas del complemento. C4a se libera tras la escisión de C4 y contribuye a la señalización inmunitaria innata modulando las respuestas inflamatorias locales en coordinación con mecanismos efectores posteriores del complemento, incluida la formación de la convertasa de C3 y las cascadas de opsonización. La variación en el número de copias del gen C4A y en la actividad del complemento se ha asociado con desregulación inmunitaria, incluida la autoinmunidad y procesos neuroinflamatorios, lo que convierte a C4A en un locus clave para estudios mecanísticos. En modelos celulares, la perturbación de C4A ayuda a definir cómo la señalización mediada por el complemento se interseca con el manejo de antígenos, las redes de citocinas y la homeostasis tisular.
C4a El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C4A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C4A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C4A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C4A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.