c-Jun CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2): sc-400077-KO-2

Übersicht

JUN kodiert c-Jun, eine zentrale Komponente des AP-1-Transkriptionsfaktorkomplexes, der extrazelluläre Signale in kontextabhängige Genexpressionsprogramme integriert. c-Jun wird durch Stress- und mitogene Signale rasch induziert und über Phosphorylierung nachgeschaltet an MAPK/JNK-Kaskaden reguliert, wodurch Transkriptionsantworten geformt werden, die Proliferation, Differenzierung, Apoptose und inflammatorische Signalgebung steuern. Über die AP-1-abhängige Regulation von Zytokinen, Enzymen des Matrixumbaus und Zellzyklusregulatoren verknüpft c-Jun die Signaltransduktion mit Veränderungen der Chromatinzugänglichkeit und der transkriptionellen Ausgabe. Eine fehlregulierte JUN/AP-1-Aktivität wird mit onkogener Transformation, Tumorinvasion sowie immunologischen und neuroinflammatorischen Prozessen in Verbindung gebracht und macht JUN zu einem zentralen Knotenpunkt für mechanistische Studien in humanen Krankheitsmodellen.

Das c-Jun CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des JUN-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des JUN-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von JUN nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die c-Jun-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von JUN-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der c-Jun-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf JUN-Exone abzielen, die für die c-Jun-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere JUN-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom c-Jun CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom c-Jun CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des JUN-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das c-Jun HDR-Plasmid (h) und c-Jun HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von JUN-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten JUN-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.