C/EBP δ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400772

概要

CEBPD は転写因子 C/EBPδ をコードしており、C/EBPδ はベーシック・ロイシンジッパー（bZIP）型タンパク質として、自然免疫シグナル伝達、細胞ストレス応答、分化に関連する遺伝子発現プログラムを制御します。C/EBPδ は炎症性刺激によって誘導され、サイトカイン経路や Toll 様受容体（TLR）経路の下流にある転写ネットワークに関与することで、急性期反応や骨髄系機能に関わるメディエーターの発現を形作ります。さらに、細胞周期制御や生存シグナルとも連携し、状況依存的に増殖、細胞老化、代謝適応の制御に寄与します。CEBPD 活性の破綻は炎症性疾患や複数のがんの文脈で報告されており、疾患関連シグナル状態における転写制御を研究するための機序的な要所（ノード）としての有用性が支持されています。

C/EBP δ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCEBPD遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CEBPD内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CEBPDのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、C/EBP δタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、C/EBP δシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CEBPD欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• C/EBP δの機能に不可欠なCEBPDエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CEBPDゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• C/EBP δ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびC/EBP δ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CEBPD遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  C/EBP δ HDRプラスミド（h）および C/EBP δ HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCEBPDホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCEBPD標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。