BTN2A2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-433634

Übersicht

Btn2a2 kodiert Butyrophilin‑Unterfamilie 2, Mitglied A2 (BTN2A2), ein Transmembranprotein der Immunglobulin‑Superfamilie, das als ko‑inhibitorischer Regulator von T‑Zell‑Antworten wirkt. Bei Mäusen moduliert die BTN2A2‑Expression auf antigenpräsentierenden Zellen die Aktivierungsschwelle von T‑Zellen und unterstützt die periphere Toleranz, indem sie Proliferation und Zytokinproduktion begrenzt. Diese checkpoint‑ähnliche Aktivität verortet BTN2A2 in Signalwegen, die die Signalübertragung an der immunologischen Synapse, Kostimulation und die Aufrechterhaltung der Immunhomöostase steuern. Eine dysregulierte BTN2A2‑Signalgebung wurde in experimentellen Modellen mit veränderten Entzündungsreaktionen in Verbindung gebracht, die für Autoimmunität, Infektionen und Tumor‑Immun‑Interaktionen relevant sind.

Das BTN2A2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Btn2a2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Btn2a2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Btn2a2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BTN2A2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Btn2a2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BTN2A2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Btn2a2-Exone abzielen, die für die BTN2A2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Btn2a2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BTN2A2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom BTN2A2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Btn2a2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BTN2A2 HDR-Plasmid (m) und BTN2A2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Btn2a2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Btn2a2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.