BTG3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407253

Übersicht

BTG3 (B-cell Translocation Gene 3) kodiert ein antiproliferatives Protein aus der BTG/TOB-Familie, das zur Koordination der Zellzykluskontrolle und der zellulären Differenzierung beiträgt. BTG3 fungiert als transkriptioneller Koregulator und interagiert mit Signalwegen, die den G1/S-Übergang, DNA-Schadensantworten und apoptotische Signalübertragung steuern, wodurch seine Aktivität mit der Aufrechterhaltung der genomischen Stabilität verknüpft ist. Eine veränderte BTG3-Expression wurde in mehreren Tumorkontexten beschrieben und wird häufig mit dysregulierter Proliferation, Stressantwort-Signalisierung und Veränderungen des Differenzierungszustands assoziiert, was BTG3 zu einem nützlichen Ansatzpunkt für mechanistische Studien zur Wachstumskontrolle macht.

Das BTG3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BTG3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BTG3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BTG3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BTG3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BTG3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BTG3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BTG3-Exone abzielen, die für die BTG3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BTG3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BTG3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom BTG3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BTG3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BTG3 HDR-Plasmid (h) und BTG3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BTG3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BTG3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.