BTBD2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-431551

Übersicht

Btbd2 kodiert BTBD2, ein Protein mit BTB/POZ-Domäne, das vermutlich als Adapter in Protein-Protein-Interaktionsnetzwerken fungiert, welche die ubiquitinabhängige Proteostase und den regulierten Abbau zellulärer Faktoren beeinflussen. Mit BTBD2 assoziierte Prozesse wurden mit der Kontrolle der Signalintensität und stressantwortender Signalwege in Verbindung gebracht, indem sie die Proteinstabilität modulieren, mit nachgeschalteten Effekten auf Zellzyklusprogression und Differenzierungsprogramme. In Mausmodellen ermöglicht eine Perturbation von Btbd2 zu untersuchen, wie BTB-Domänen-Scaffolds zur Gewebehomöostase und zu Entwicklungsphänotypen beitragen. Eine dysregulierte Proteostase und eine gestörte Kontrolle von Signalwegen sind für die Krankheitsbiologie breit relevant, einschließlich Kontexte mit Proliferationsdefekten und neuroentwicklungsbedingter Vulnerabilität.

Das BTBD2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Btbd2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Btbd2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Btbd2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BTBD2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Btbd2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BTBD2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Btbd2-Exone abzielen, die für die BTBD2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Btbd2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BTBD2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom BTBD2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Btbd2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BTBD2 HDR-Plasmid (m) und BTBD2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Btbd2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Btbd2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.