Plasmide Double Nickase (h) bradykinin B1 R: sc-401169-NIC

BDKRB1 code le récepteur de la bradykinine B1 inductible, un récepteur couplé aux protéines G dont l’expression est augmentée par les signaux inflammatoires et les lésions tissulaires. Lorsqu’il est activé par les kinines des-Arg, le récepteur B1 de la bradykinine (bradykinin B1 R) favorise une signalisation via les voies Gαq/Gαi, qui élèvent le calcium intracellulaire et activent les programmes MAPK et NF-κB, modulant ainsi la production de cytokines, le recrutement des leucocytes et les réponses vasculaires. Ce récepteur participe à des réseaux de signalisation inflammatoires et nociceptifs et est fréquemment étudié dans des contextes tels que l’inflammation chronique et les mécanismes liés à la douleur, ainsi que la dysfonction vasculaire et le stress métabolique. Des altérations de l’expression et de la signalisation de BDKRB1 ont été associées à des microenvironnements inflammatoires pertinents pour la maladie, ce qui soutient son utilisation comme nœud mécanistique pour l’analyse des voies dans des modèles cellulaires humains.

bradykinin B1 R Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BDKRB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BDKRB1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BDKRB1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BDKRB1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.