Particules Lentivirales d'Activation (h) BMP-4: sc-400543-LAC

Le gène humain **BMP4** code la protéine morphogénétique osseuse 4 (BMP‑4), un ligand sécrété de la superfamille **TGF‑β** qui transmet ses signaux via les récepteurs **BMP de type I/II** afin d’activer **SMAD1/5/8** et les programmes transcriptionnels en aval. BMP‑4 régule la mise en place des patrons embryonnaires, l’induction du mésoderme, la différenciation ostéogénique et chondrogénique, ainsi que la spécification de lignage dans de multiples contextes tissulaires. Au-delà de la signalisation canonique via les SMAD, BMP‑4 peut interagir avec les voies **MAPK**, **WNT** et **NOTCH** pour orienter les décisions de destinée cellulaire, la morphogenèse et le remodelage de la matrice extracellulaire. Une activité dérégulée de BMP4/BMP‑4 a été impliquée dans des anomalies du développement et dans des processus pertinents en pathologie tels que la fibrose, le remodelage vasculaire et les signaux de différenciation associés au microenvironnement tumoral, ce qui étaye son utilisation dans des études mécanistiques des voies de signalisation.

Les particules d'activation lentivirales BMP-4 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de BMP4 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales BMP-4 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription BMP4, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de BMP-4. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif BMP4 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.