BMP-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402432

Übersicht

BMP1 kodiert das bone morphogenetic protein 1 (BMP-1), eine sekretierte Metalloprotease, die als Prokollagen‑C‑Proteinase und als zentrales Enzym der Reifung der extrazellulären Matrix (EZM) fungiert. BMP-1 spaltet strukturelle Vorläuferproteine, darunter Prokollagene und weitere EZM-assoziierte Proteine, und koordiniert dadurch die Kollagenfibrillogenese, den Gewebeumbau sowie matrixabhängige Zellsignale. Über seine Funktionen beim Aufbau und Umsatz der EZM überschneidet sich die BMP-1-Aktivität mit Signalwegen, die Zelladhäsion, Migration und Mechanotransduktion in Bindegeweben steuern. Eine Fehlregulation der BMP1-Funktion wird mit erblichen und erworbenen Erkrankungen in Verbindung gebracht, die durch abnorme Kollagenverarbeitung und beeinträchtigte Knochen‑/Bindegewebsintegrität gekennzeichnet sind, was BMP1 für Studien zur Matrixbiologie und zur Skelettentwicklung relevant macht.

Das BMP-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BMP1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BMP1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BMP1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BMP-1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BMP1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BMP-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BMP1-Exone abzielen, die für die BMP-1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BMP1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BMP-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom BMP-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BMP1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BMP-1 HDR-Plasmid (h) und BMP-1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BMP1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BMP1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.