Plasmide Double Nickase (h) BLVRB: sc-405988-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BLVRB correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BLVRB Double Nickase (h) et le plasmide BLVRB Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BLVRB. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BLVRB Antibody (B-9): sc-373692
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BLVRB | sc-405988-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BLVRB | sc-405988-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BLVRB (biliverdine réductase B) code une oxydoréductase cytosolique dépendante du NAD(P)H qui catalyse la réduction de la biliverdine IXβ et de tétrapyrroles apparentés en isomères de bilirubine, contribuant au catabolisme de l’hème et au maintien de l’équilibre rédox cellulaire. En régulant les pools intracellulaires de biliverdine/bilirubine et le tamponnement associé des espèces réactives de l’oxygène, BLVRB relie le renouvellement de l’hème aux réponses au stress oxydatif et à l’homéostasie métabolique. L’enzyme est exprimée dans de nombreux tissus et est souvent étudiée dans des contextes où la gestion du fer/de l’hème recoupe l’inflammation, la fonction mitochondriale et la biologie érythroïde. Les altérations du métabolisme des tétrapyrroles et de l’état rédox sont fréquemment explorées dans les maladies hépatiques et hématologiques, ce qui fait de BLVRB un point d’intérêt pour des études mécanistiques des voies d’adaptation au stress.
BLVRB Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BLVRB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BLVRB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BLVRB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BLVRB.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.