Plasmide CRISPR/Cas9 KO Bex1 (m): sc-422657

Présentation

BEX1 (brain expressed X-linked 1) code une petite protéine intracellulaire enrichie dans les tissus neuraux et impliquée dans la différenciation neuronale, le guidage axonal et le contrôle du cycle cellulaire. BEX1 participe à des réseaux de signalisation liés aux réponses aux neurotrophines/NGF et peut moduler des programmes transcriptionnels en interagissant avec des protéines régulatrices qui influencent les voies de survie et de stress. Dans le système nerveux en développement et adulte, une expression altérée de BEX1 a été associée à des modifications de la croissance des neurites et du maintien neuronal, ce qui étaye sa pertinence pour la recherche en neurodéveloppement et en neurodégénérescence. Une dérégulation de BEX1 a également été rapportée dans plusieurs ensembles de données d’expression liés au cancer, où elle a été associée à des phénotypes de prolifération et d’apoptose dans des modèles de biologie tumorale.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Bex1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Bex1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Bex1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Bex1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Bex1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Bex1 pour l'étude de la signalisation de Bex1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Bex1 essentiels à la fonction de Bex1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Bex1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Bex1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Bex1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Bex1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Bex1 plasmide HDR (m) et le Bex1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Bex1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Bex1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.