Particules Lentivirales d'Activation (h) betaKlotho: sc-401614-LAC

Le gène humain **KLB** code la **bêtaKlotho**, un co‑récepteur transmembranaire à passage unique qui confère une spécificité de ligand à la signalisation endocrine des FGF, en particulier **FGF19/FGF15** et **FGF21**. En formant des complexes récepteurs avec les **FGFR**, la bêtaKlotho régule des programmes transcriptionnels liés aux voies **MAPK/ERK** et **PI3K/AKT**, qui contrôlent l’homéostasie des acides biliaires, le métabolisme des lipides et du glucose, ainsi que l’équilibre énergétique. L’expression de **KLB** est enrichie dans des tissus métaboliques tels que le foie et le tissu adipeux, où elle module une signalisation sensible aux nutriments et le dialogue endocrine. Des altérations de l’activité ou de l’expression de la bêtaKlotho ont été associées à une dysrégulation métabolique et à la biologie de maladies apparentées, faisant de **KLB** un nœud clé pour les études mécanistiques des voies hépatométaboliques.

Les particules d'activation lentivirales betaKlotho (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de KLB dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales betaKlotho (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription KLB, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de betaKlotho. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif KLB ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.